Osteoarthritis (OA) သည် နာတာရှည် အရိုးအဆစ်များ ယိုယွင်းပျက်စီးနေသော ရောဂါများထဲမှ တစ်ခုဖြစ်ပြီး အသက် 65 နှစ်အထက် သက်ကြီးရွယ်အိုများကို ထိခိုက်စေပါသည်။
1] ယေဘူယျအားဖြင့် OA လူနာများကို ပျက်စီးနေသော အရိုးနုများ၊ ရောင်ရမ်းနေသော synovium နှင့် chondrocytes များ တိုက်စားခံရပြီး နာကျင်မှုနှင့် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ ပင်ပန်းမှုများကို ဖြစ်စေသည်
2] အဆစ်အမြစ်ရောင်ရမ်းခြင်းကြောင့် အရိုးအဆစ်များ ရောင်ရမ်းခြင်းကြောင့် အများစုမှာ အရိုးနုများ ပြင်းထန်စွာ ပျက်စီးသွားသောအခါတွင် အရိုးများ အချင်းချင်း ထိမိပြီး သည်းမခံနိုင်သော နာကျင်မှုနှင့် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ ပင်ပန်းနွမ်းနယ်မှုတို့ကို ဖြစ်စေသည်။
3] နာကျင်ခြင်း၊ ရောင်ရမ်းခြင်းနှင့် အဆစ်များ တောင့်တင်းခြင်းစသည့် လက္ခဏာများပါရှိသော ရောင်ရမ်းဖျန်ဖြေပေးသူများ၏ ပါဝင်မှုကို ကောင်းမွန်စွာ မှတ်တမ်းတင်ထားပါသည်။ OA လူနာများတွင် အရိုးနုနှင့် subchondral အရိုးများကို တိုက်စားစေသည့် ရောင်ရမ်းသော cytokines များကို synovial fluid တွင် တွေ့ရှိရသည်။
4] OA လူနာများ ယေဘူယျအားဖြင့် နာကျင်ခြင်း နှင့် synovial ရောင်ရမ်းခြင်း တို့ဖြစ်သည်။ ထို့ကြောင့် လက်ရှိ OA ကုထုံးများ၏ အဓိကပန်းတိုင်မှာ နာကျင်မှုနှင့် ရောင်ရမ်းမှုကို သက်သာစေရန်ဖြစ်သည်။ [
5] စတီးရွိုက်မဟုတ်သော နှင့် စတီးရွိုက်မဟုတ်သော ဆေးဝါးများ အပါအဝင် ရရှိနိုင်သော OA ကုသမှုများသည် နာကျင်မှုနှင့် ရောင်ရမ်းမှုကို သက်သာစေရန် သက်သေပြနိုင်သော်လည်း အဆိုပါဆေးများကို ရေရှည်အသုံးပြုခြင်းသည် နှလုံးသွေးကြောဆိုင်ရာ၊ အစာအိမ်နှင့် အူလမ်းကြောင်းဆိုင်ရာ လုပ်ဆောင်ချက်များကဲ့သို့ ပြင်းထန်သော ကျန်းမာရေးဆိုင်ရာ အကျိုးဆက်များရှိသည်။
6] ထို့ကြောင့် osteoarthritis ကုသမှုအတွက် ဘေးထွက်ဆိုးကျိုးနည်းသော ပိုမိုထိရောက်သောဆေးကို တီထွင်ရန် လိုအပ်ပါသည်။
ဘေးအန္တရာယ်ကင်းရှင်းပြီး လွယ်ကူစွာရရှိနိုင်သောကြောင့် သဘာဝကျန်းမာရေးထုတ်ကုန်များသည် လူကြိုက်များလာပါသည်။
7] ရိုးရာကိုရီးယားဆေးဝါးများသည် အဆစ်အမြစ်ရောင်ခြင်းအပါအဝင် ရောင်ရမ်းသောရောဂါများစွာကို ထိရောက်စွာ နှိမ်နင်းနိုင်သည်
8] Aucklandia lappa DC ကိုက်ခဲခြင်းကို သက်သာစေရန်နှင့် အစာအိမ် သက်သာစေရန် qi ၏ သွေးလည်ပတ်မှုကို အားကောင်းစေခြင်း ကဲ့သို့သော ၎င်း၏ ဆေးဘက်ဆိုင်ရာ ဂုဏ်သတ္တိများကြောင့် လူသိများပြီး အစဉ်အလာအားဖြင့် သဘာဝ အကိုက်အခဲပျောက်ဆေးအဖြစ် အသုံးပြုသည်။
9] ယခင်အစီရင်ခံစာများအရ A. lappa တွင် ရောင်ရမ်းမှုကို ဆန့်ကျင်သော အစွမ်းသတ္တိများ ပါ၀င်သည် ။
10,
11] အကိုက်အခဲပျောက်ဆေး [
12]၊ ကင်ဆာ[
13] နှင့် အစာအိမ်ရောဂါကာကွယ်ခြင်း [
14] သက်ရောက်မှု။ A. lappa ၏ ဇီဝကမ္မဆိုင်ရာ လုပ်ဆောင်ချက်များသည် ၎င်း၏ အဓိက တက်ကြွသော ဒြပ်ပေါင်းများဖြစ်သည့် costunolide၊ dehydrocostus lactone၊ dihydrocostunolide၊ costuslactone၊ α-costol၊ saussurea lactone နှင့် costuslactone [
15] အစောပိုင်းလေ့လာမှုများအရ costunolide သည် lipopolysaccharide (LPS) တွင် ရောင်ရမ်းမှုကို ဆန့်ကျင်သည့် ဂုဏ်သတ္တိများပြသခဲ့ပြီး NF-kB နှင့် အပူရှိန်ပရိုတိန်းလမ်းကြောင်းကို ထိန်းချုပ်ခြင်းဖြင့် macrophages ကိုလှုံ့ဆော်ပေးသော
16,
17] သို့သော်လည်း OA ကုသမှုအတွက် A. lappa ၏ ဖြစ်နိုင်ချေရှိသော လုပ်ဆောင်ချက်များကို လေ့လာမှုတစ်ခုမျှ မတွေ့ရှိခဲ့ပါ။ လက်ရှိသုတေသနသည် (monosodium-iodoacetate) MIA နှင့် acetic acid-induced ကြွက်မော်ဒယ်များကိုအသုံးပြု၍ OA ကိုဆန့်ကျင်သည့် A. lappa ၏ကုထုံးအကျိုးသက်ရောက်မှုကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခဲ့သည်။
Monosodium-iodoacetate (MIA) ကို တိရိစ္ဆာန်များတွင် နာကျင်မှုဆိုင်ရာ အပြုအမူများနှင့် OA ၏ ဇီဝကမ္မဆိုင်ရာ အင်္ဂါရပ်များစွာကို ထုတ်လုပ်ရန် ကျော်ကြားသော အသုံးပြုသည်။
18,
19,
20] ဒူးဆစ်များအတွင်းသို့ ထိုးသွင်းသောအခါ၊ MIA သည် chondrocyte ဇီဝြဖစ်ပျက်မှုကို ချေဖျက်ပေးပြီး အရိုးနုနှင့် subchondral အရိုးများ တိုက်စားခြင်းကဲ့သို့သော ရောင်ရမ်းမှုနှင့် ရောင်ရမ်းမှုလက္ခဏာများကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်၊ OA [
18] အက်ဆီတစ်အက်ဆစ်ဖြင့် လှုံ့ဆော်ပေးသော ရင်ခုန်သံတုံ့ပြန်မှုကို တိရစ္ဆာန်များတွင် ရောင်ရမ်းနာကျင်မှုကို ပမာဏအလိုက် တိုင်းတာနိုင်သည့် တိရစ္ဆာန်များတွင် အရံနာကျင်မှုကို ပုံဖော်ခြင်းအဖြစ် ကျယ်ပြန့်စွာ မှတ်ယူကြသည်။
19] mouse macrophage ဆဲလ်လိုင်း RAW264.7 ကို ရောင်ရမ်းခြင်းအတွက် ဆဲလ်များတုံ့ပြန်မှုများကို လေ့လာရန် ရေပန်းစားစွာအသုံးပြုသည်။ LPS ဖြင့် အသက်သွင်းပြီးနောက်၊ RAW264 macrophages များသည် ရောင်ရမ်းမှုလမ်းကြောင်းများကို အသက်သွင်းပြီး TNF-α၊ COX-2၊ IL-1β၊ iNOS နှင့် IL-6 ကဲ့သို့သော ရောင်ရမ်းမှုကြားခံများကို လျှို့ဝှက်ပေးသည်။
20] ဤလေ့လာမှုသည် MIA တိရိစ္ဆာန်မော်ဒယ်တွင် OA ကိုဆန့်ကျင်သည့် A. lappa ၏ဆန့်ကျင်ဘက်အာရုံခံနိုင်စွမ်းနှင့် ရောင်ရမ်းမှုဆန့်ကျင်သည့်အကျိုးသက်ရောက်မှုများကို အကဲဖြတ်ထားပါသည်။
2. ပစ္စည်းများနှင့် နည်းလမ်းများ
၂.၁။ အပင်ရုပ်
A.lappa DC ၏ အမြစ်ခြောက်။ စမ်းသပ်မှုတွင် အသုံးပြုသည့် Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea) မှ ၀ယ်ယူခဲ့သည်။ ဆေးပညာဌာနမှ ပါမောက္ခ Donghun Lee၊ ကိုးရီးယားဆေးပညာ၊ Gachon တက္ကသိုလ်မှ Col. မှ တွေ့ရှိခဲ့ပြီး ဘောက်ချာနမူနာနံပါတ်ကို 18060301 အဖြစ် အပ်နှံခဲ့သည်။
၂.၂။ HPLC မှ A. lappa ထုတ်ယူမှုကို လေ့လာခြင်း။
A. lappa ကို reflux ယန္တရား (ပေါင်းခံရေ၊ 100°C တွင် 3 နာရီ) ဖြင့် ထုတ်ယူခဲ့သည်။ ထုတ်ယူထားသော ဖြေရှင်းချက်အား ဖိအားနည်းသော အငွေ့ပျံစက်ဖြင့် စစ်ထုတ်ပြီး ပေါင်းစည်းထားပါသည်။ A. lappa ထုတ်ယူမှုသည် −80°C အောက်တွင် အေးခဲအခြောက်ခံပြီးနောက် အထွက်နှုန်း 44.69% ရှိသည်။ A. lappa ၏ Chromatographic ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို 1260 InfinityⅡ HPLC-system (Agilent, Pal Alto, CA, USA) အသုံးပြု၍ HPLC နှင့် ချိတ်ဆက်ထားသည်။ chromatic ခွဲခြားခြင်းအတွက် EclipseXDB C18 ကော်လံ (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ကို 35°C တွင် အသုံးပြုခဲ့သည်။ နမူနာ၏ စုစုပေါင်း 100 mg ကို 50% methanol ၏ 10 mL တွင် အရည်ဖျော်ပြီး 10 မိနစ်ကြာ အသံသွင်းထားသည်။ နမူနာများကို 0.45 μm (Waters Corp., Milford, MA, USA) ဆေးထိုးဆေးစစ်ဖြင့် စစ်ထုတ်ထားပါသည်။ မိုဘိုင်းအဆင့်ဖွဲ့စည်းမှုမှာ 0.1% ဖော့စဖောရစ်အက်ဆစ် (A) နှင့် acetonitrile (B) ဖြစ်ပြီး ကော်လံကို အောက်ပါအတိုင်း ဖယ်ထုတ်ထားသည်- 0-60 မိနစ်၊ 0%; 60-65 မိနစ်၊ 100%; 65–67 မိနစ်၊ 100%; 67-72 မိနစ်၊ 1.0 mL/min စီးဆင်းမှုနှုန်းဖြင့် 0% solvent B။ 10 μL ဆေးထိုးပမာဏကို အသုံးပြု၍ 210 nm တွင် စွန့်ပစ်ပစ္စည်းများကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို triplicate ဖြင့်လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။
၂.၃။ တိရစ္ဆာန် အိမ်ရာနှင့် စီမံခန့်ခွဲမှု
အသက် 5 ပတ်ရှိ Male Sprague–Dawley (SD) ကြွက်များနှင့် အသက် 6 ပတ်ရှိ ICR ကြွက်ထီးများကို Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) မှ ဝယ်ယူခဲ့သည်။ တိရစ္ဆာန်များကို အဆက်မပြတ် အပူချိန် (22 ± 2°C) နှင့် စိုထိုင်းဆ (55 ± 10%) နှင့် အလင်း/အမှောင်စက်ဝန်း 12/12 နာရီ အသုံးပြု၍ အခန်းထဲတွင် သိမ်းဆည်းထားသည်။ တိရိစ္ဆာန်များသည် စမ်းသပ်မှုမစတင်မီ တစ်ပတ်ကျော်တွင် အခြေအနေနှင့် ရင်းနှီးကျွမ်းဝင်ခဲ့ကြသည်။ တိရစ္ဆာန်များတွင် အစာနှင့်ရေကို ကြော်ငြာပေးဝေမှုတစ်ခုရှိသည်။ Gachon တက္ကသိုလ် (GIACUC-R2019003) တွင် တိရိစ္ဆာန်များ စောင့်ရှောက်မှုနှင့် ကိုင်တွယ်ခြင်းအတွက် လက်ရှိကျင့်ဝတ်စည်းကမ်းများကို တိရစ္ဆာန်စမ်းသပ်မှုလုပ်ထုံးလုပ်နည်းအားလုံးတွင် တင်းကြပ်စွာ လိုက်နာခဲ့ပါသည်။ လေ့လာမှုအား စုံစမ်းစစ်ဆေးသူ-မျက်ကန်းနှင့် အပြိုင်စမ်းသပ်မှုကို ဒီဇိုင်းထုတ်ထားသည်။ တိရစ္ဆာန်စမ်းသပ်ကျင့်ဝတ်ကော်မတီ၏ လမ်းညွှန်ချက်များအရ euthanasia နည်းလမ်းကို လိုက်နာဆောင်ရွက်ခဲ့ပါသည်။
၂.၄။ MIA ထိုးဆေးနှင့် ကုသမှု
ကြွက်များကို အတုအယောင်၊ ထိန်းချုပ်မှု၊ အင်ဒိုမီသစင် နှင့် A.lappa ဟူ၍ အုပ်စု ၄ ခု ခွဲခြားထားသည်။ 2% isofluorane O2 အရောအနှောဖြင့် မေ့ဆေးပေးခြင်းဖြင့် ကြွက်များကို 50 μL ၏ MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ဖြင့် ဒူးဆစ်များအတွင်း ပေါင်းစပ်၍ စမ်းသပ် OA ကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်။ ကုသမှုများကိုအောက်ပါအတိုင်းလုပ်ဆောင်ခဲ့သည်- ထိန်းချုပ်မှုနှင့် အတုအယောင်အုပ်စုများကို AIN-93G အခြေခံအစားအစာဖြင့်သာ ထိန်းသိမ်းထားသည်။ AIN-93G အစားအစာတွင် ထည့်သွင်းထားသော indomethacin အုပ်စုကိုသာ AIN-93G နှင့် A. lappa 300 mg/kg အုပ်စုအား AIN-93G ဖြည့်စွက်ထားသော အစားအသောက်များတွင် သတ်မှတ်ပေးထားပါသည်။ ခန္ဓာကိုယ်အလေးချိန် 190-210 ဂရမ်လျှင် 15-17 ဂရမ်နှုန်းဖြင့် OA သွင်းသည့်နေ့မှစပြီး ကုသမှုများကို 24 ရက်ကြာ ဆက်လက်လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။
၂.၅။ ကိုယ်အလေးချိန် တိုင်းတာခြင်း။
OA induction ပြီးနောက်၊ ကြွက်များ၏ နောက်ခြေလက်အင်္ဂါများ၏ အလေးချိန်ခံနိုင်ရည်ကို တိုင်းတာခြင်းအား စီစဉ်ထားသည့်အတိုင်း မစွမ်းဆောင်နိုင်သော-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) ဖြင့် ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ နောက်ခြေလက်အင်္ဂါများပေါ်ရှိ အလေးချိန်ခွဲဝေမှုကို တွက်ချက်ထားသည်- အလေးချိန်ထမ်းနိုင်မှု (%)
